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Physikalisch-Technische Bundesanstalt

FachabteilungenAbt. 8 Medizinphysik und metrologische Informationstechnik 8.3 Biomedizinische Optik8.31 Gewebeoptik und molekulare Bildgebung > Lasergestützte Fluoreszenzdiagnostik
Gewebeoptik und molekulare Bildgebung
Arbeitsgruppe 8.31

Lasergestützte Fluoreszenzdiagnostik

Ziel

Nachweis von Tumoren und Tumorvorstufen (Dysplasien) des Gastrointestinaltraktes (Speiseröhre, Magen, Dickdarm) an Hand der fluoreszenzgestützten Endoskopie.

Medizinische Bedeutung

Eine erfolgreiche Behandlung von Krebserkrankungen wird wesentlich durch den Zeitpunkt der Entdeckung bösartiger Gewebeveränderungen bestimmt. Deshalb kommt der Entwicklung von Methoden zum frühzeitigen Nachweis von Tumoren bzw. ihrer Vorstufen eine große Bedeutung zu.

Methode

Der körpereigene Farbstoff  Protoporphyrin IX (PpIX) reichert sich nach Gabe von Aminolävulinsäure, eine für die Synthese des roten Blutfarbstoffes wichtige Substanz, in Tumoren an. Nach Anregung von PpIX mit kurzen Laserpulsen (3 ns) geeigneter Wellenlänge (z.B. 505 nm) wird ein Teil des Anregungslichtes als Fluoreszenzlicht wieder abgestrahlt. Dieses Fluoreszenzlicht klingt nach der Anregung wesentlich langsamer ab als das anderer, gleichzeitig angeregter körpereigener Farbstoffe. Daher können durch die verzögerte Aufnahme von Fluoreszenzbildern oder -spektren mit einer intensivierten CCD-Kamera Tumoren sowie insbesondere auch Dysplasien anhand des nahezu untergrundfreien Porphyrinsignals besser erkannt werden.

Die Abbildung 1 zeigt das Layout und den in der Charité Campus Mitte durch Mitarbeiter der PTB entwickelten und betriebenen Messplatz. Das Laserlicht wird in den für die (konventionelle) Kaltlichtbeleuchtung des Endoskops erforderlichen Lichtleiter mit Hilfe eines Miniprismas eingekoppelt. Zur Beobachtung der Verteilung der Fluoreszenzintensität dient ein zusätzlicher (zweiter) Bildleiter, der durch den Arbeitskanal eines doppellumigen Endoskops geführt wird.

Abb. 1: Layout und Photographie der in der Charité eingesetzten Messapparatur.

Durch die gepulste Anregung und den zeitaufgelösten Nachweis der Fluoreszenz ist es möglich, gleichzeitig Fluoreszenz- und Weißlicht-Reflexionsbilder des gleichen Gesichtfeldes während der Endoskopie zu beobachten und aufzunehmen.

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Bisherige Ergebnisse

Fluoreszenzgeführte endoskopische Untersuchungen wurden bereits bei über 100 Patienten und gemeinsam von der Charitè und der PTB durchgeführt. Dabei konnte die Treffsicherheit bei der Biopsieentnahme erhöht und die notwendige Anzahl der Biopsien deutlich gesenkt werden. Zur Illustration ist eine Dysplasie im Barrett´s Ösophagus in Abb. 2 dargestellt. Während das Weißlicht-Reflexionsbild (links) hinsichtlich der Gut- oder Bösartigkeit der Veränderungen keine Entscheidung ermöglicht, ist anhand der erhöhten PpIX-Fluoreszenz (rechts) eine Dysplasie gegenüber der umgebenden Schleimhaut zu erkennen.

 

     

Abb. 2: Reflexionsbild (links) und Fluoreszenzbild (rechts) aufgenommen mit einem Endoskop. Rechts im Fluoreszenzbild ist eine Dysplasie in der Grün bis Gelb gefärbten Region dargestellt.

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Kooperationen

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Veröffentlichungen:

  1. K.T. Moesta, B. Ebert, T. Handke, H. Rinneberg, P. Schlag 
    Fluorescence as a concept in colorectal lymph node diagnosis. Recent Results.
    Cancer Res.; 157:293-304. (2000) Review
  2. K.T. Moesta, B. Ebert T. Handke, D. Nolte, Ch. Nowak, W.E. Haensch, R.K. Pandey, T.J. Dougherty, H. Rinneberg and P. Schlag 
    Protoporphyrin IX occurs naturally in colorectall cancers and their metastases. 
    Cancer Res., 61, 991-999 (2001)
  3. B. Ebert, U. Sukowski, D. Grosenick, H. Wabnitz, K. T. Moesta, K. Licha, A. Becker, W. Semmler, P. M. Schlag, H. Rinneberg
    NIR fluorescent dyes for enhanced contrast in optical mammography: Phantom experiments. 
    J. Biomed. Opt., 6, 134-140 (2001)
  4. A. Becker, C. Hessenius, K. Licha, B. Ebert, U. Sukowski, W. Semmler, B. Wiedenmann and C. Grötzinger
    Receptor-targeted optical imaging of tumors with near-infrared fluorescent ligands. 
    Nature Biotechnol., 19, 327-331 (2001) 
  5. K. Licha, B. Riefke, B. Ebert, C. Grötzinger
    Cyanine dyes as contrast agents in biomedical optical imaging.
     
    Acad Radiol. Suppl 2:S320-2 (2002)
  6. M.-A.E.J. Ortner, K. Zumbusch, J. Liebetruth, B. Ebert, B. Fleige, M. Dietel, H. Lochs
    Is topical delta-aminolevulinic acid adequate for photodynamic therapy in Barrett´s esophagus? A  pilot study.
    Endoscopy, 34(8), 611-6 (2002) 
  7. M.-A.E.J. Ortner, B. Ebert, E. Hein, K. Zumbusch, D. Nolte, U. Sukowski, J. Weber-Eibel, B. Fleige, M. Dietel, M. Stolte, G. Oberhuber, R. Porschen, B. Klump, H. Hörtnagel, H. Lochs, H. Rinneberg:
    Time gated fluorescence spectroscopy in Barrett´s esophagus.
    GUT, 52, 28-33 (2003)
  8. K. Licha, N. Debus, S. Emig-Vollmer, B. Hofmann, M. Hasbach, D. Stibenz, S. Sydow, M. Schirner, B. Ebert, D. Petzelt, C. Bührer, W. Semmler, R. Tauber
    Optical molecular imaging of lymph nodes using a targeted vascular contrast agent.
    J Biomed Optics, 10, 41205  (2005)
  9. A Thomas, S. Kümmel, F. Fritzsche, M. Warm, B. Ebert, B. Hamm, Th. Fischer
    Real-Time Sonoelastography Performed in Addition to B-Mode Ultrasound and Mammography: Improved Differentiation of Braest Lesions.
    Academic Radiology, 13, 1496-1504 (2006)
  10. M.-A.E.J. Ortner, V. Fusco, B. Ebert, U. Sukowski, J. Weber-Eibel, B. Fleige, M. Stolte, G. Oberhuber, H. Rinneberg, H. Lochs
    Time-gated Fluorescence Spectroscopy Improves Endoscopic Detection of  Low-Grade Dysplasia in Ulcerative Colitis.
    Gastrointestinal Endoscopy, in press

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